細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低的原因

細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低的原因細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗是指將DNA、RNA等外源物質(zhì)通過電轉(zhuǎn)染或化學(xué)轉(zhuǎn)染的方式導(dǎo)入至細(xì)胞內(nèi)的實驗方法。不同的細(xì)胞系轉(zhuǎn)染難度也各部相同，尤其是對生長條件要求較為苛刻的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率會遠(yuǎn)低于其他細(xì)胞。這里，盤點了一下那些可能導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低的原因、轉(zhuǎn)染試劑選擇指南，以便提升您的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。一、實驗條件和操作方法不合規(guī)正常情況下，做細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗前需要充足的準(zhǔn)備，比如：細(xì)胞、DNA、轉(zhuǎn)染試劑、培養(yǎng)基等。除了合規(guī)的實驗條件以外，還有較為重要的就是實驗操作方法...

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Western實驗步驟

Western，也稱Westernblot、Westernblotting、Western印跡，常簡寫為WB，是用抗體檢測蛋白表達(dá)的重要方法之一。碧云天試劑總結(jié)Western實驗步驟可如下進(jìn)行操作。1.收集蛋白樣品(Proteinsamplepreparation)根據(jù)實驗需要，使用適當(dāng)?shù)牧呀庖?，例如碧云天生產(chǎn)的Western及IP細(xì)胞裂解液(P0013/P0013J)、RIPA裂解液(P0013B/P0013C/P0013D/P0013K)、NP-40裂解液(P0013F)...

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Nano-300微量分光光度計操作說明

Nano-300微量分光光度計操作說明操作步驟1）開機(jī)∶打開儀器背面電源開關(guān)，儀器啟動并進(jìn)入自檢界面，根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇相應(yīng)功能。2）檢測（以dsDNA檢測為例）∶在主頁面選擇核酸功能，將儀器上的無塵紙移開，準(zhǔn)備開始檢測。a）在主界面選“核酸檢測”b）依照DNA所溶于的液體準(zhǔn)備該溶液作為空白液。取2ul空白液加到下基座上，放下上基座并點擊“空白檢測”。b）使用干凈無塵紙把基座上的空白液擦拭干凈，輸入樣品名稱等信息。c）取2ul樣品加到下基座上，放下上基座并點擊“樣品檢測”。注意...

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轉(zhuǎn)染試劑分類和應(yīng)用

轉(zhuǎn)染是一種將外來顆粒和核酸轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中的技術(shù)，它可以通過化學(xué)的方式來實現(xiàn)。轉(zhuǎn)染試劑用于提高基因?qū)嶒灥男剩瑥亩梢栽趹?yīng)用基因和基因組令人難以置信的功能領(lǐng)域進(jìn)行大量研究。在所有轉(zhuǎn)染實驗中，轉(zhuǎn)染方式的選擇尤為重要。下面描述了一些較突出的基于化學(xué)的轉(zhuǎn)染試劑。一、基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體是包裹帶負(fù)電荷的核酸序列的陽離子脂質(zhì)。它們被細(xì)胞膜吸引并通過內(nèi)吞作用整合到宿主細(xì)胞中。內(nèi)體酶分解脂質(zhì)體，DNA片段被釋放到細(xì)胞質(zhì)中。這些囊泡是由磷脂人工制造的，主要來自含有帶負(fù)電荷和中性脂質(zhì)的混合物...

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Lip 3000轉(zhuǎn)染試劑與Lipofectamine2000的區(qū)別

Lipofectamine3000簡稱LIP3000采用了脂質(zhì)體納米微粒技術(shù)，提供了出眾的轉(zhuǎn)染性能和可重復(fù)的結(jié)果。它適用于各種難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞和常見的細(xì)胞，在保證轉(zhuǎn)染效率的同時也提高了細(xì)胞存活率。Lipofectamine3000試劑可以將難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率提升10倍左右，同時還可以降低細(xì)胞的死亡率。另外，LIP3000還具有多功能性，在某些情況下，它甚至可以取代電穿孔，由于提升了轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的存活率，從而也簡化了工作流程。盡管Lipofectamine2000十分受歡迎，但...

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